日本进口HORIBA堀场实时荧光寿命成像光谱
FLIMera是一款由HORIBA推出的实时荧光寿命成像相机，采用宽场成像技术，能够在视频速率下实现动态FLIM研究，突破了传统扫描式系统的速度限制，适用于活体样本的快速过程观测‌。

日本进口HORIBA堀场实时荧光寿命成像光谱

FLIMera是一款由HORIBA推出的实时荧光寿命成像相机，采用宽场成像技术，能够在视频速率下实现动态FLIM研究，突破了传统扫描式系统的速度限制，适用于活体样本的快速过程观测‌。

核心特点‌

‌视频速率动态成像‌

FLIMera是专为‌实时动态过程‌设计的宽场FLIM相机，不同于逐点扫描的共聚焦系统，它能以类似摄像的方式在‌视频帧率下捕捉荧光寿命变化‌，适合研究细胞运动、信号传导等快速生物学事件 。

‌全像素TCSPC架构‌

每个像素均具备时间相关单光子计数（TCSPC）能力，可同时获取‌24,576条独立的荧光衰减曲线‌，实现高精度、高空间分辨率的寿命成像，支持复杂的多组分寿命分析 。

‌高灵敏度与抗噪能力‌

工作在单光子水平，具备检测灵敏度，特别适合弱信号检测。TCSPC技术仅记录第一个到达光子，有效抑制背景噪声，提升信噪比 。

‌灵活的数据采集模式‌

支持多种操作模式：

‌手动/定时采集‌：用于常规FLIM数据获取

‌HDF5文件流模式‌：可无损记录每个光子的时间戳信息，支持后期重建与深度分析，适用于长时间动态监测 。

‌配套软件支持‌

与‌EzTime Image‌软件无缝集成，提供直观的系统控制、数据采集与分析功能，简化从实验设置到结果输出的全流程 。

‌应用场景‌

‌生命科学‌：实时监测活细胞内的分子相互作用、代谢状态（如NAD(P)H无标记成像）、离子浓度变化（如Ca²⁺、pH）

‌神经科学‌：结合FRET技术，研究神经递质释放与受体激活的动态过程

‌材料科学‌：分析光电材料（如量子点、钙钛矿）的发光动力学与载流子寿命

‌临床前研究‌：用于皮肤成像、眼科检查等非侵入性体内诊断

 日本进口HORIBA堀场实时荧光寿命成像光谱

FLIM成像-成像新概念

HORIBA FLIMera 相机是 FLIM 技术的一个新概念。它是一个宽场成像相机，而不是一个共焦点扫描系统，其优点是可以用简单的摄像技术在视频速率下研究 FLIM 动态。

·每个像素的TCSPC架构可同时提供24,576衰减曲线

·复杂的多组份寿命研究

·直接获取衰减动力学

·可实现多达5个指数的衰减曲线分析

·EzTimeImage---简单而高效的软件界面

·适用于复杂和精密的分子分析，如活细胞动力学研究和疾病诊断的生物标志物检测

CMOS技术的进步促进了基于像素阵列的成像传感器的发展，每个像素基于一个时间数字转换器(TDC)，包含一个单光子雪崩光电二极管(SPAD)及其相关的电子计时装置。

这使得基于时间相关单光子计数技术(TCSPC)的快速(视频速率)荧光寿命测定在每个像素中得以独立实现(图1)，

一个192x128像素的图像传感器，采用40nm CMOS技术，被整合到一个宽视场外延荧光显微镜装置中。该传感器具有13%的填充因子，每个18.4x 9.2m的像素包含一个分辨率<40 ps的TDC。从而可同时进行24.576次荧光寿命测量，每次测量包含4.096个时间段。通过专用固件和HORIBA EzTimeImage软件，荧光强度和平均寿命以及 TCSPC成像测量产生的相位图可以同时以视频(>30 fps)速率实时显示(图2) 。

操作模式

FLIMera是为配合HORBA高度直观的Ez Time lImage软件使用而设计的。该软件用于FLIMera 的控制、数据采集和分析。FLIMera 提供4种操作模式。

·手动-用户开始和停止采集，提供TCSPC强度图像和用于寿命分析的FLIM数据。

·定时-用户定义采集的运行时间，提供TCSPC强度图像和用于寿命分析的FLIM数据。

·流向HDF5文件-TCSPC数据可以在用户确定的时间段内流向一个HDF5文件，包含了每个像索中每个光子的完整记录，无数据丢失，并可用于重建帧以进行衰减分析。

·相位图-对直方图的补充，能够以相位图的形式实时显示和选择寿命数据，如图3所示。相位图需要使用标准样品寿命进行初始校准。